Цитометр — прибор, который используется для анализа клеток в потоке жидкости, поэтому он называется «проточным». Каждая частица исследуется отдельно, при том, что в один момент должны быть проанализированы десятки тысяч клеток. Поэтому цитометрия как метод анализа настолько распространена — она точная и достоверная.
Сфера применения цитометрии и цитометров очень широка: в первую очередь, это анализ — подсчёт клеток, клеточный цикл, их здоровье и апоптоз, сигналинг, трансфекция, токсикологические исследования и иммунофенотипирование, необходимое в таких областях как гематология, иммунология, онкология. Образцами выступают клетки животных, человека, растений, бактерии и дрожжи, микрочастицы и микроводоросли.
Главный компонент цитометра — проточная ячейка. Клетки выстраиваются в ней в ряд в ламинарном потоке жидкости, после чего проходят через лазерный луч. Луч, попав в струю жидкости, рассеивается, вызывая флуоресценцию красителей — ими промаркированы структуры. После этого свет попадает на детекторы, которые переводят его в цифровой сигнал, пропорциональный интенсивности света. Вся информация переводится на язык статистики и цифр и хранится в компьютерной системе, к которой подключён проточный цитометр (перейти к товарам).
Комплектация проточных цитометров бывает разная. Например, различают несколько видов ячеек:
Различают и тип лазеров, используемых в цитометрах:
Из них наиболее распространён голубой как самый универсальный. Цвет влияет на флуорохромы, применяемые для окрашивания. Количество и комплектацию лазеров можно увеличивать, таким образом расширяя количество флуорохромов, что важно для проведения некоторых цитометрических исследований. При этом цвет может собираться одновременно для всех лазеров, создавая так называемую коллинеарную систему, а может отдельно для каждого.
Варьируются и детекторы:
В ходе работы цитометра фотоны преобразуются в электроимпульс, величина которого пропорциональна свету, который попал на детектор. Чем больше в клетке окрашенных структур, тем сильнее флуоресценция, соответственно, сильнее сигнал. Исследуется при этом общая интенсивность сигнала.
Проточная цитометрия и цитометры встречаются во многих областях науки и производства. Например:
В целом же это очень эффективный метод анализа клеток. Он востребован в медицине — при диагностике и лечении пациентов без качественного и надёжного проточного цитометра не обойтись.
Комментарии
Пока никто не оставлял здесь записей.